УДК 632.937
ОТБОР ШТАММОВ БАКТЕРИЙ ИЗ БИОРЕСУРСНОЙ КОЛЛЕКЦИИ   ФГБНУ ФНЦБЗР «ГОСУДАРСТВЕННАЯ КОЛЛЕКЦИЯ ЭНТОМОАКАРИФАГОВ И МИКРООРГАНИЗМОВ: МИКРООРГАНИЗМЫ», ПЕРСПЕКТИВНЫХ ДЛЯ БИОЗАЩИТЫ ЯБЛОНИ ОТ НАСЕКОМЫХ-ВРЕДИТЕЛЕЙ
Л.Д. Рашид
Кубанский государственный университет, г. Краснодар
Е.Ю. Гырнец
Федеральный научный центр биологической защиты растений, г. Краснодар
А.А. Цыгичко
Федеральный научный центр биологической защиты растений, г. Краснодар
А.М. Асатурова
Федеральный научный центр биологической защиты растений, г. Краснодар
В статье приведены данные о первичном скрининге штаммов бактерий из биоресурсной коллекции ФГБНУ ФНЦБЗР, перспективных против насекомых-вредителей плодовых насаждений. 

Плодовые культуры на протяжении всего вегетационного периода повреждаются насекомыми-вредителями, снижающих не только урожайность, но и качество получаемой продукции. Среди чешуекрылых вредителей яблонная плодожорка Cydia pomonella L. является наиболее лабильным представителем вредной энтомофауны. В процессе своей жизнедеятельности данный вид может привести к нарушению физиологических процессов у плодовых насаждений, задерживая их рост и развитие. 
C. pomonella L. способна повредить до 90 % плодов не только яблони, но и сливы, груши, айвы. Ареал обитания этого фитофага охватывает Восточную и Западную Европу, Восточную Сибирь, Кавказ. Прямой вред наносит гусеница – вгрызается в мякоть плода, а затем стремиться проникнуть в семенную камеру. Поврежденные плоды кажутся преждевременно созревшими и опадают, теряют товарные качества, подвергаются заражению патогенами и становятся непригодными для хранения (Бондарчук, Асатурова, Томашевич, Цыгичко, Гырнец, 2020).
На сегодняшний день за один вегетационный сезон яблони могут проводить от 30 до 40 обработок пестицидами. Многократное применение химических инсектицидов приводит к увеличению пестицидной нагрузки на агроценозы, способствует формированию резистентных популяций вредителей, а также вызывает массовую гибель полезной энтомофауны. В связи с этим актуальна переориентация хозяйств на применение биологических препаратов с высокой эффективностью, но при этом не оказывающих негативное влияние на окружающую среду (Shaw, Nagy, Fountain, 2014). Наиболее распространенными биоинсектицидами для защиты растений являются препараты на основе бактерий Bacillus thuringiensis, способных выделять эндотоксины, вызывающие гибель насекомого-вредителя.
Цель работы – скрининг штаммов бактерий из биоресурсной коллекции ФГБНУ Федерального научного центра биологической защиты растений по критерию инсектицидной активности, перспективных для биозащиты яблони от насекомых-вредителей. 
Материал и методы
Работу проводили на базе лаборатории микробиологической защиты растений ФГБНУ ФНЦБЗР с использованием материально-технической базы УНУ «Технологическая линия для получения микробиологических средств защиты растений нового поколения» (http://ckp-rf.ru/registered No 671367 реестровый № 671367). Исследования проводили в период с 2019 по 2020 гг. Объекты исследования – 9 аборигенных штаммов бактерий из биоресурсной коллекции ФГБНУ ФНЦБЗР «Государственная коллекция энтомоакарифагов и микроорганизмов: микроорганизмы»: BZR 278, BZR 588, BZR 206, BZR 920, BZR 277, BZR 736, BZR 517, BZR 647, BZR 336g. Штаммы выделены из различных стаций Краснодарского и Ставропольского края. 
В качестве тест-объекта использовали гусениц вощиной моли Galleria mellonella L. 3-5 возраста. G. mellonella L. – один из самых распространённых тест-объектов для оценки энтомопатогенной активности и других микробиологических исследований.
Опыт проводили в трехкратной повторности. На одну повторность приходилось по 5 чашек Петри, в каждую помещали по 10 гусениц. Гусеницам скармливали искусственную питательную среду (ИПС), однократно обработанную бактериальной суспензией. В контрольном варианте ИПС обрабатывали стерильной водой.
Биологическую эффективность штаммов бактерий оценивали по количеству живых и погибших особей на третьи и пятые сутки после обработки по формуле Хендерсона и Тилтона (Долженко, 2004), которая учитывает изменения численности как в опытном, так и контрольном варианте:

				 ) * 100,					(1)

где Э – эффективность, выраженная процентом снижения численности насекомых–вредителей с поправкой на контроль;
Од – число живых особей перед обработкой в опыте, шт;
Оп – число живых особей после обработке в опыте, шт;
Кд – число живых особей в контроле перед обработкой, шт;
Кп – число живых особей в контроле после обработки, шт. 
Результаты и обсуждение
В лабораторных условиях был произведен скрининг 9 штаммов бактерий на наличие энтомопатогенной активности в отношении большой восковой моли G. mellonella L. (табл. 1). В ходе эксперимента у зараженных гусениц сначала была отмечена бледная окраска покровов тела, а затем тело насекомого размягчалось до пастообразного состояния. Такие симптомы могут свидетельствовать о наличии бактериальной инфекции (Бурцева, Штерншис, Калмыкова, 2001).
В результате полученных данных максимальную энтомопатогенную активность проявил штамм BZR 278, вызвав гибель у 97 % гусениц большой восковой моли на третьи сутки. На том же уровне инсектицидное действие показал штамм BZR 588, у которого биологическая эффективность на третьи и пятые сутки составила 95 %. В вариантах с применением BZR 206 и BZR 920 штаммы проявили высокую эффективность – на третьи сутки смертность достигла 93 %. При обработке ИПС суспензией штамма BZR 277 гибель гусениц большой восковой моли составила 83 %. 

Таблица 1 – Энтомопатогенная активность штаммов бактерий в отношении большой восковой моли G. mellonella L. 
Вариант	Количество живых гусениц, шт.	Биологическая эффективность, %	
	до обработки	после обработки, сут.	
		3	5	3	5	
BZR 278	50	1	1	97	97	
BZR 588	50	2	2	95	95	
BZR 206	50	3	3	93	93	
BZR 920	50	3	3	93	93	
BZR 277	50	8	8	83	83	
BZR 736	50	40	37	17	22	
BZR 517	50	46	46	5	5	
BZR 647	50	50	47	0	3	
BZR 336g	50	48	48	1	1	
Контроль	50	49	49	-	

В то же время четыре штамма бактерий проявили слабую энтомопатогенную активность. Смертность G. mellonella L. при применении суспензий BZR 736, BZR 517, BZR 647 и BZR 336g была ниже 30 %. Так, штамм BZR 736 вызвал гибель 22 % большой восковой моли. А в вариантах BZR 517, BZR 647 и BZR 336g эффективность была менее 10 %, что сопоставимо с естественной смертностью насекомых в опыте. 
В результате исследований выявлены штаммы бактерий, которые проявили высокую энтомопатогенную активность в отношении восковой моли G. mellonella L.: BZR 278, BZR 588, BZR 206, BZR 920 и BZR 277.
Проведенные исследования показали перспективность потенциального использования 5 штаммов бактерий из биоресурсной коллекции «Государственная коллекция энтомоакарифагов и микроорганизмов: микроорганизмы» ФГБНУ ФНЦБЗР в качестве основы для нового эффективного биопрепарата.
Библиографический список
Бондарчук Е.Ю., Асатурова А.М., Томашевич Н.С., Цыгичко А.А., Гырнец Е.А. Биологический контроль численности яблонной плодожорки на основе энтомопатогенных микроорганизмов (обзор) // Достижения науки и техники АПК, №11, 2020. С. 53– 66.
Бурцева Л.И., Штерншис М.В., Калмыкова Г.В. Патогены насекомых: структурные и функциональные аспекты // под ред. В. В. Глупова М., 2001. С. 189–246.
Долженко В.И., Методические указания по регистрационным испытаниям инсектицидов, акарицидов, моллюскоцидов и родентицидов в сельскомхозяйстве // Всероссийский научно-исследовательский институт защиты растений Российской академии сельскохозяйственных наук, 2004. С. 354–355.
Shaw B., Nagy C., Fountain M.T. Organic Control Strategies for Use in IPM of Invertebrate Pests in Apple and Pear Orchards // Insects, №12 (12), 2021. P. 1106–1133.